细胞因子中和实验模式

靶细胞	刺激分子	检测项	使用情形
细胞系或原代细胞	人源细胞因子	生物学活性（如靶细胞增殖、凋亡、细胞因子释放），和靶细胞胞内信号通路激活（如激酶磷酸化）	抗体药筛选和功能性确认
报告基因细胞系	人源细胞因子	报告基因活性	抗体药筛选，CMC阶段活性质量放行

案例分享

案例一：TNF-α的中和实验

肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在调控系统性炎症中起到重要作用，其分泌的失调被认为与许多人类疾病有关，包括阿兹海默氏症、癌症、重性抑郁障碍和肠炎。TNF-α诱导的L-929细胞死亡是研究细胞程序性坏死的重要模型。基于此模型，金斯瑞蓬勃生物建立了TNF-α蛋白以及其中和抗体体外功能表征方法。细胞增殖抑制实验显示TNF-α对L-929细胞的杀伤作用，而其中和抗体Adalimumab 抑制了TNF-α对细胞的杀伤。

案例二：IL-6的中和实验

白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）是一种多功能细胞因子，可同时起到调节免疫应答和抗感染免疫反应的作用。临床研究结果显示，IL-6水平的升高与肿瘤、呼吸道以及肾脏疾病密切相关。阻断或者中和IL-6已成为治疗自免疫疾病的新一代疗法。

根据IL-6的信号通路和生物学功能，金斯瑞蓬勃生物建立了多种体外功能活性检测方法。以TF-1细胞为靶细胞，IL-6通过JAK信号通路激活胞内STAT3磷酸化并促进细胞增值。IL-6的中和抗体Siltuximab，抑制了IL-6对JAK信号通路的激活，减弱STAT3磷酸化，继而TF-1细胞的增殖被抑制。

案例三：VEGF报告基因法

血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor, VEGF) 可与内皮细胞具有特异性结合，从而诱导血管新生。在有肿瘤生长的情况下，多种致癌因素触发致使促血管内皮细胞生长因子的分泌水平增高，促进肿瘤组织生成大量不规则的新血管，为肿瘤提供了优越的生长环境。 本实验使用金斯瑞蓬勃生物自主构建的VEGF报告基因细胞系，VEGF和VEGFR的结合可以激活报告基因的表达。VEGF中和抗体Bevacizumab可以阻断两者的结合，减弱报告基因的表达。