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金斯瑞ProSpeed™单B细胞抗体药发现服务

24小时完成筛选

单B细胞筛选平台简介

单B细胞筛选平台(Single B Cell Screening Platform),也可以称为B细胞克隆技术(Single B Cell Cloning),以微流控技术为基础,直接对B细胞进行单细胞水平的分离,分析与筛选,从而精准、高效的筛选出分泌目标抗体分子的B细胞,再结合单细胞测序技术,即可得到目标抗体序列。除了对动物进行免疫、作为起始材料进行筛选以外,该技术也可以使用康复病人的PBMC作为起始材料,或对全人转基因小鼠进行免疫,筛选后直接获得全人抗体序列。

金斯瑞ProSpeed™单B细胞筛选服务

金斯瑞引进了Berkeley Lights公司的Beacon™ 单细胞光导系统(基于Micro-chamber的B细胞筛选平台),再加上在抗体药发现,细胞操作等方面的数十年丰富的经验以及完善的上下游平台,可以给客户提供一站式的单B细胞分选服务、用于进行抗体药开发,为您的抗体药发现之旅保驾护航。

Workflow

服务特色

  • 对挑战性靶点有突出优势

    • 高阳性率:利用单B细胞筛选平台,在筛选早期阶段提前锁定高质量抗体分子
    • 低阳性率:减少由于细胞融合步骤造成的多样性损失
  • 兼容人源样本品>

    • 直接从人外周血中筛选出全人抗体
    • 适用于传染性疾病研究

金斯瑞单B细胞筛选平台有能力在一天完成数万B细胞筛选,24小时内即可完成筛选工作,如果将其与全人源小鼠的快速免疫相结合、或使用康复病人的样本进行筛选,单B细胞筛选平台则最短可以在1个月拿到全人抗体分子。2020年伊始,新型冠状病毒疫情牵动着每个人的心。金斯瑞承接了相应的应急抗体药物筛选项目。使用快速免疫的全人源小鼠,只用了不到12小时,即成功筛选出了特异性识别病毒蛋白和有潜力阻断病毒结合细胞受体的多个抗体。我们相信这一平台在未来将能助力更多开发者,找到其心仪的先导抗体。Case Study

案例研究

  • Case Study
    • 122 bead binder

      122 bead binder

    • 95 cell binder

      95 cell binder

    • 35 cross reactive to cyno antigen

      35 cross reactive to cyno antigen

    • 82 mapped to a different epitope than a positive control antibody

      82 mapped to a different epitope than a positive control antibody

在这一Case Study中,一张芯片中实现了8058个单B细胞的筛选,其中有122个Protein-binders, 这其中有95个Cell-binders,82个可以识别与阳参抗体不同的表位。进一步检测发现,其中有35个B细胞分泌的抗体具有猴抗原交叉活性。

对于单B细胞有着多种不同分选机制,目前市面上存在基于FACS的分选、基于液滴微流控(Micro-droplet)的分选、基于微印记技术(Micro-engrave)的分选和基于微流控小室(Micro-chamber)的分选机制(如Beacon™)。可以看出,各单B细胞平台都可以实现对单B细胞不同程度的高通量筛选,而基于微流控技术的各平台也展现了其高灵敏度的优势。但能否更高效的应用于新型抗体分子的发现,in-chip assay的能力则是需要进一步考虑的关键点。Beacon™可以实现in-chip的多重检测:不仅可以完成基于蛋白的抗原抗体特异性结合检测,也可以利用抗原过表达细胞系检测抗体与细胞表面抗原的结合。除此以外,Beacon™可以实现更丰富的功能性筛选,包括阻断实验、交叉活性,表位验证等。另外,不仅检测类型多样,检测的灵敏度也极高,同时可以记录动态的检测过程(可以观测到信号随时间的变化);准确度方面,由于Beacon™使用了光导技术实现了对细胞的精准操控,下游验证实验中证明假阳性大大低于其他筛选平台的平均水平,阳性率达到99%-100%。

市场中单B细胞分选技术平台的比较

Sorting Platform Throughput Accuracy Automation Sensitivity Assay Capability
Multiple test Cell based assay
FACS Medium Low Low Low Y N
Microdroplets High Low Medium High Y N
Microengraved
micro/nanowells
Medium Medium Low High N N
Microfluidic Chamber
(Beacon™)
Sufficient High High High Y Y

金斯瑞单B细胞分选服务

筛选通量为两张芯片,可获得更多有结合力的分子;尤其适合挑战性靶点项目。

项目 服务内容 周期
免疫原准备 Protein labelling 蛋白标记
细胞鉴定(FACS)
免疫 选项1: 免疫(常规动物模型) 8-10周
选项2: 免疫(人源化小鼠) 8-14周
基于Beacon™的单B细胞分选
(2张芯片)
必选 IgG分泌检测 1-2 周*
抗原特异性结合检测
可选 基于细胞的表位作图
基于细胞的抗原特异性结合测试
基于细胞的种间交叉试验
基于细胞的配体封闭试验
基于蛋白的其他试验 (如种间交叉反应试验, 额外的抗原结合测试)
测序 对满足客户需求的单B细胞进行单细胞VH/VL测序 1周
重组抗体生产 抗体表达与纯化 1-2 周

*所有筛选均在一天完成,其他为数据分析、项目沟通时间

筛选通量为两张芯片

项目 服务内容 周期
免疫原准备 质粒合成
DNA 鉴定 & 基因枪
蛋白标记
细胞鉴定
免疫 选项1: DNA免疫 10-12 周
选项2: 细胞免疫
选项3: DNA & 免疫
基于Beacon™的单B细胞分选 (2张芯片) 必选 IgG分泌检测 1-2 周*
于细胞的抗原结合测试
可选 基于细胞的表位作图
基于细胞的种间交叉分析
基于细胞的抗体封闭试验
测序 对满足客户需求的单B细胞进行单细胞VH/VL测序 1周
重组抗体生产 抗体表达与纯化 1-2 周

*所有筛选均在一天完成,其他为数据分析、项目沟通时间

服务流程图