抗体药物开发杂交瘤发现

Powerdoma^TM杂交瘤筛选平台获得的杂交瘤上清支持多种高通量检测方式，包括ELISA ， FACS及基于Cell-based的Mirrorball检测，使用384高通量检测和传统96孔检测结果阳性孔保持高度一致。

图例1 ELISA 384整板检测结果

图例2 FACS 384与96检测体系对比

通过Powerdoma^TM杂交瘤平台可以尽早地获得单克隆抗体，从而可以在抗体发现的早期阶段就进行多类功能性筛选。金斯瑞蓬勃生物可以通过 Powerdoma^TM 杂交瘤上清液提供各种高通量功能性检测（内化检测、KD ELISA、报告基因检测和 GPCR 检测）。

案例分享: 通过Powerdoma^TM上清液进行TIGIT 报告基因检测

金斯瑞蓬勃生物利用Powerdoma^TM 杂交瘤筛选平台在多个靶点上均筛选到阳性单克隆抗体，从融合到获得序列平均周期为32天。NGS测序后，利用HTP-96重组抗体生产得到含嵌合抗体的重组上清，均检测到了较好的结合活性:

图1 多个靶点重组抗体上清ELISA binding检测结果

金斯瑞蓬勃通过杂交瘤发现技术，从小鼠免疫开始，在116天内成功筛选出靶向人源蛋白的小鼠抗体。

融合后从19200个杂交瘤克隆中，经过人、猴蛋白种属交叉筛选以及FACS细胞抗体结合活性筛选，获得79个阳性克隆。从中挑选4个最优的抗体先导分子构建嵌合抗体，利用96孔HTP重组抗体生产12天内得到重组上清进行检测。其中1株转阴，另外3株抗体均与人、猴蛋白抗原有较好的结合活性，且均能结合高表达的人靶点蛋白的细胞系。

图2 单跨膜靶点A小鼠抗体发现流程图

图3 重组上清ELISA binding检测结果

筛选分子均与人、猴的靶点蛋白有较好的种属交叉活性。

图4 重组上清FACS binding检测结果

筛选分子均能结合表达人源蛋白细胞系。