什么是CAR-T疗法？
嵌合抗原受体T细胞（也称为CAR T细胞）是一种通过基因工程产生的人工T细胞，用于免疫治疗。
CAR-T细胞疗法是使用CAR(通常是scFv或sdAb)改造的T细胞进行癌症治疗的免疫疗法。CAR-T免疫治疗通过CAR来识别癌细胞，从而更有效地锁定并摧毁癌细胞。
细胞外结合域与抗原的亲和力显著影响CAR-T细胞的靶向杀伤能力。
A.J. Smith et al. 2016. Chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapy for malignant cancers: Summary and perspective
CAR-T细胞疗法研发流程
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- 治疗性抗体的评价标准首先是其生物学功能，其次是亲和力等其他指标。
- 所以功能测定是在初步筛选之后进行的。
- 筛选规模更大，可增加获得功能良好的候选分子的机会。
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- 在初步筛选后直接以scFv的分子形式进行表达。
- 因为抗体分子在CAR-T开发中的作用角色是靶向工具，所以在选择scFv或sdAb候选抗体时，亲和力是首要考虑因素。因此我们将亲和力排序步骤前置。
- 特异性检测可根据客户要求进行。
- CAR-T细胞的功能应该在得到CAR-T产品后进行验证，而不需要对scFv或sdAb本身进行功能验证。
服务特色
针对CAR候选分子发现设计的抗体发现方案
- 在初步筛选后进行SPR亲和力排序确保挑选出高亲和力分子
- 针对scFv和sdAb进行优化的抗体优化策略
- 多种体外药效检测方法可供选择
同时具备scFv和sdAb发现能力，且每种分子形式有两套可选技术路线
- scFv：杂交瘤/单B细胞筛选
- sdAb：单域抗体免疫库和天然库
成功为CAR-T细胞疗法公司提供了超过20个项目的抗体发现服务
可提供下游生产服务，包括质粒和慢病毒载体工艺开发和GMP生产
T细胞表面CAR表达水平
图 1. CAR转导10天后，流式检测抗CD19 CAR-T细胞和非转导对照细胞中CAR的表达量。 用抗CD3抗体和抗FLAG（CD19-FLAG）抗体对细胞染色后分析。
体外功能验证
A
B
图 2. 抗CD19 CAR-T细胞的功能验证。 (A) 细胞毒性实验验证抗CD19 CAR-T细胞杀伤功能。Raji细胞经过改造后可以表达萤光素酶，将效应细胞 (CAR-T)与CD19阳性的这个地方添加了一个描述靶细胞 (Raji) 以20∶1的比例培养24小时，通过Raji 细胞的生物发光信号减少的程度来推断其细胞毒性作用。 (B) Raji 靶细胞活化抗CD19 CAR-T细胞使其分泌细胞因子，通过ELISA分析上清液中分泌的IFN-γ指示抗CD19 CAR-T 细胞的功能。