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CAR候选分子发现服务

ProCARTM CAR候选分子发现服务

针对CAR候选分子发现设计的抗体发现方案

什么是

CAR-T疗法?

嵌合抗原受体T细胞(也称为CAR T细胞)是一种通过基因工程产生的人工T细胞,用于免疫治疗。

CAR-T细胞疗法是使用CAR(通常是scFv或sdAb)改造的T细胞进行癌症治疗的免疫疗法。CAR-T免疫治疗通过CAR来识别癌细胞,从而更有效地锁定并摧毁癌细胞。

细胞外结合域与抗原的亲和力显著影响CAR-T细胞的靶向杀伤能力。

CAR候选分子发现

A.J. Smith et al. 2016. Chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapy for malignant cancers: Summary and perspective

CAR-T细胞疗法研发流程

CAR-T细胞疗法研发流程
治疗性抗体发现策略
    • 治疗性抗体的评价标准首先是其生物学功能,其次是亲和力等其他指标。
    • 所以功能测定是在初步筛选之后进行的。
    • 筛选规模更大,可增加获得功能良好的候选分子的机会。
    • 在初步筛选后直接以scFv的分子形式进行表达。
    • 因为抗体分子在CAR-T开发中的作用角色是靶向工具,所以在选择scFv或sdAb候选抗体时,亲和力是首要考虑因素。因此我们将亲和力排序步骤前置。
    • 特异性检测可根据客户要求进行。
    • CAR-T细胞的功能应该在得到CAR-T产品后进行验证,而不需要对scFv或sdAb本身进行功能验证。

服务特色

针对CAR候选分子发现设计的抗体发现方案

  • 在初步筛选后进行SPR亲和力排序确保挑选出高亲和力分子​
  • 针对scFv和sdAb进行优化的抗体优化策略
  • 多种体外药效检测方法可供选择​

同时具备scFv和sdAb发现能力,且每种分子形式有两套可选技术路线

  • scFv:杂交瘤/单B细胞筛选
  • sdAb:单域抗体免疫库和天然库

成功为CAR-T细胞疗法公司提供了超过20个项目的抗体发现服务

可提供下游生产服务,包括质粒和慢病毒载体工艺开发和GMP生产

T细胞表面CAR表达水平

T细胞表面CAR表达水平

图 1. CAR转导10天后,流式检测抗CD19 CAR-T细胞和非转导对照细胞中CAR的表达量。 用抗CD3抗体和抗FLAG(CD19-FLAG)抗体对细胞染色后分析。

体外功能验证

  • A

    体外功能验证
  • B

    体外功能验证

图 2. 抗CD19 CAR-T细胞的功能验证。 (A) 细胞毒性实验验证抗CD19 CAR-T细胞杀伤功能。Raji细胞经过改造后可以表达萤光素酶,将效应细胞 (CAR-T)与CD19阳性的这个地方添加了一个描述靶细胞 (Raji) 以20∶1的比例培养24小时,通过Raji 细胞的生物发光信号减少的程度来推断其细胞毒性作用。 (B) Raji 靶细胞活化抗CD19 CAR-T细胞使其分泌细胞因子,通过ELISA分析上清液中分泌的IFN-γ指示抗CD19 CAR-T 细胞的功能。

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